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顯色培養(yǎng)基的保存條件很苛刻,應(yīng)該怎么保存

更新時間:2019-03-20  |  點(diǎn)擊率:1040
     顯色培養(yǎng)基的保存條件很苛刻,應(yīng)該怎么保存
  一般是在分離培養(yǎng)基中加入檢測某些菌種的特異性酶底物。該底物由產(chǎn)色基團(tuán)和微生物可代謝物質(zhì)組成,通常為無色。但在特異性酶作用下游離出發(fā)色基團(tuán)并顯示一定顏色,直接觀察菌落顏色即可對菌種做出鑒定。
  顯色培養(yǎng)基通常為干粉狀,容易保存。加蒸餾水溶解后,也無須高壓滅菌,煮沸即可倒平板,劃線接種,置適宜溫度下培養(yǎng)一定時間即可。培養(yǎng)時間依具體培養(yǎng)基而定,通常是18-24小時,比傳統(tǒng)時間顯著縮短。
  顯色培養(yǎng)基是一類利用微生物自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)顯色的原理來檢測微生物的新型培養(yǎng)基。這些相應(yīng)的顯色底物是由產(chǎn)色基因和微生物部分可代謝物質(zhì)組成,在特異性酶作用下,游離出產(chǎn)色基因顯示一定顏色,直接觀察菌落顏色即可對菌種作出鑒定。它是一種新型分離培養(yǎng)基,利用顯色培養(yǎng)基進(jìn)行微生物的篩選分離,其反應(yīng)的靈敏度和特異性大大優(yōu)于傳統(tǒng)培養(yǎng)基。
  有研究人員用7種干擾菌對傳統(tǒng)培養(yǎng)基和顯色培養(yǎng)基進(jìn)行了測試,仍然發(fā)現(xiàn)顯色培養(yǎng)基的抗干擾能力更強(qiáng),不過也同時指出,BS平板與顯色培養(yǎng)基搭配起來效果更好。
  顯色培養(yǎng)基保存的步驟:
 ?。ㄒ唬?zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
 ?。ǘ┬U齪H值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1NHCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
  (三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
 ?。ㄋ模┓盅b:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。
 ?。ㄎ澹缇号囵B(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。
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