2017年，ISO出臺了一個沙門氏菌檢查的標準，即ISO 6579-1-2017 食物鏈的微生物 沙門氏菌檢測計數(shù)和血清分型的水平方法。第1部分是沙門氏菌屬的檢測。該方法面向的是食品、乳與乳制品、動物飼料、動物糞便和食品加工處理的環(huán)境樣品。下面將該方法簡要描述一下：

步：預增菌。

ISO推薦的仍是緩沖蛋白胨水（簡稱BPW）（非選擇性液體培養(yǎng)基）：先將BPW放置室溫。接種后，34-38℃孵育18h。如果是大量樣品（1L以上），則建議先將BPW預熱至34-38℃，再和樣品混合。ISO指出：沙門氏菌經(jīng)常小量存在，并伴隨有大量的其他腸桿菌科成員。預增菌的目的是用于能檢測到低豐度的沙門氏菌或受損傷的沙門氏菌。

第二步：選擇性增菌。

ISO推薦是兩種選擇性增菌培養(yǎng)基，同時使用。種是含大豆的RVS肉湯或MSRV瓊脂（Rappaport-Vassiliadis瓊脂），41.5℃孵育24h，第二種是MKTTn肉湯，37℃孵育24h。ISO還指出，MSRV瓊脂適合有動力的沙門氏菌，不適合無動力的沙門氏菌。

第三步：分離。

即接種到推薦的兩種選擇性固體培養(yǎng)基上。種是XLD瓊脂，37℃孵育24h以上。典型菌落為黑色中心，紅色輕微透明光暈。但有個別例外，即H2S陰性沙門氏菌變種為粉色菌落，深粉色中心；乳糖發(fā)酵陽性的沙門氏菌為黃色菌落，有或沒有黑色中心。ISO推薦再選用一個選擇性培養(yǎng)基進行分離。我們推薦HiMedia公司生產(chǎn)的顯色培養(yǎng)基HiCrome 沙門氏菌HiVeg 瓊脂（貨號MV1296）HiCrome是HiMedia顯色培養(yǎng)基的標識，HiVeg是培養(yǎng)基無動物成分，用植物蛋白胨取代動物蛋白胨的標識，這樣培養(yǎng)基無動物源成分帶來的瘋牛病風險。

該顯色培養(yǎng)基建立在Rambach瓊脂基礎(chǔ)上，沙門氏菌菌落（包括腸炎沙門菌、鼠傷寒沙門菌、傷寒沙門菌）為淡紫色，有光暈，大腸桿菌為藍色菌落，奇異變形桿菌為無色菌落（見下圖）。該培養(yǎng)基特異性高，接種50-100CFU沙門氏菌，回收率≥50%。

第四步：驗證。

用生化試驗或血清學試驗驗證。使用生化鑒定試劑盒（鑒定條）則相當方便，我們推薦HiMedia生產(chǎn)的沙門氏菌鑒定試劑盒（KB011）。該鑒定條集成了7項生化試驗和5項糖發(fā)酵試驗，可鑒定18種沙門氏菌，許多是鑒定到種。對于菌株的鑒定，則應(yīng)進行血清學試驗。

（HiMedia生化鑒定條示意圖）

“ISO 6579-1-2017”和我國《GB 4789.4-2016 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》相比，在增菌上和分離步驟上，都有一些不同。尤其是分離步驟進行了簡化。因為市面上的沙門氏菌顯色培養(yǎng)基眾多，ISO只是推薦再選用一個選擇性培養(yǎng)基進行分離，而沒有明確指出是哪一類或是原理是什么。但HiMedia開發(fā)的沙門氏菌顯色培養(yǎng)基顯然是值得注意和推薦的一款，其沙門氏菌落上帶有紅色光暈，尤其容易辨識。